基于PI3K/AKT信号通路探讨苦参碱对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞的作用研究

摘要

目的基于PI3K/AKT信号通路探讨苦参碱对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞的影响。方法体外培养人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株,将处于对数生长期的人皮肤鳞状细胞癌A431细胞分为空白对照组和10、20、40、80 nmol/L苦参碱组。采用CCK-8法检测人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖抑制率;ELISA法检测人皮肤鳞状细胞癌A431细胞培养上清TNF-α和IL-1α的浓度;real-time qPCR法检测人皮肤鳞状细胞癌A431细胞Bax和Bcl-2基因表达;Western blot法检测人皮肤鳞状细胞癌A431细胞AKT蛋白的表达水平;分子对接验证苦参碱与AKT的结合活性。结果苦参碱给药组对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞的增殖具有明显的抑制作用。与空白对照组比较,苦参碱给药组显著降低炎症因子TNF-α、IL-1α浓度(P<0.05),显著降低人皮肤鳞状细胞癌A431细胞中Bcl-2 mRNA和AKT蛋白的表达水平(P<0.05),升高Bax mRNA表达水平(P<0.05)。苦参碱与AKT具有较好的结合活性。结论苦参碱可抑制人皮肤鳞状细胞癌A431细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制可能是通过抑制PI3K/AKT信号通路中AKT蛋白的表达,调节凋亡因子Bax和Bcl-2的表达水平,以及下调细胞炎症相关因子TNF-α和IL-1α的浓度有关。