纳豆激酶基因重组质粒在大肠杆菌与毕赤酵母中的稳定性

摘要

利用PCR方法以纳豆杆菌染色体DNA为模板扩增纳豆激酶基因片段 ,分别克隆到原核表达载体 pBV2 2 0与真核表达载体pPICZαA上 ,转化大肠杆菌HB1 0 1与毕赤酵母GS1 1 5 ,筛选重组子 ,通过限制性内切酶、PCR分析及序列测定 ,确定该重组子所携外源基因为纳豆激酶基因 ,对重组大肠杆菌与毕赤酵母中外源基因的稳定性进行研究比较 ,结果表明外源基因的插入对宿主菌的生长没有太大影响 ,重组质粒在E .coliHB1 0 1中具有良好的分离稳定性 ,而结构稳定性较差 ,而外源基因在毕赤酵母GS1 1