聚乳酸聚乙醇酸微球冷冻切片方法的研究

摘要

目的研究聚乳酸聚乙醇酸(PLGA)微球切片的制备方法,以便使用扫描电镜获得孔洞结构完整清晰的微球截面图片,为后期使用图像处理软件计算微球的孔隙率提供基础。方法使用冷冻包埋剂包埋载有牛血清白蛋白(BSA)的PLGA微球,冷冻切片获得微球截面,并用扫描电子显微镜观察切片形态,分别考察包埋剂的种类、浸泡时间、液氮冷冻等对切片质量的影响。结果优化方法为:将微球浸泡在自制的质量浓度10%明胶+5%甘油混合冷冻包埋剂中,于37℃浸泡3 h,然后转移至质量浓度20%明胶+5%甘油混合冷冻包埋剂中,于37℃浸泡1 h,再转移至-20℃的冰箱中使包埋剂凝固;切片前将包埋块浸入液氮中急速冷冻5 min。结论使用优化方法所得的PLGA微球切片,截面孔洞结构完整清晰,且操作方法简单、快速和有效。