嗜热脂肪芽孢杆菌中普鲁兰酶的分离纯化

摘要

嗜热脂肪芽孢杆菌经细胞破碎机破壁后,采用硫酸铵盐析法除杂蛋白,DEAE-32阴离子交换纤维素纯化胞内普鲁兰酶,并通过L9(34)正交试验优化盐析除杂蛋白工艺条件.结果表明:菌体与缓冲液比1:3、硫酸铵饱和度40％、pH值7.0分离效果最佳,其中,pH值对分离效果的影响差异性显著(F＞F0.05)；纯化后的普鲁兰酶比活力为26.50 U/mg,纯化倍数为8.01,回收率为73％；经SDS-PAGE检测,显示一条电泳区带,相对分子质量为55.4ku,表明获得了纯酶.