稳定表达EV71 VP4-VP2-VP3衣壳蛋白的Vero细胞系的构建

摘要

手足口病(H F M D)长期危害儿童的健康.研发E V71复制缺陷型活疫苗缺乏相应的互补细胞系.本研究通过慢病毒表达系统构建将EV71的VP4-VP2-VP3与绿色荧光基因GFP基因融合构建重组慢病毒质粒,将该质粒与慢病毒包装质粒共转染人293T细胞系,最终包装获得表达EV71 VP4-VP2-VP3衣壳蛋白的慢病毒.将获得的慢病毒接种于Vero细胞系,通过嘌呤霉素筛选最终获得一株稳定表达EV71 VP4-VP2-VP3的Vero细胞系.荧光定量PCR以及Western Blot结果表明该细胞系能够转录EV71 VP4-VP2-VP3基因并能表达.