外源性p27^(kip1)基因表达对人肝癌细胞生长抑制作用

摘要

目的 :研究 p2 7kip1基因对人肝癌细胞的生长抑制作用 .方法 :采用可诱导性真核表达载体 pMD kip1,脂质体转染法将 p2 7kip1全长cDNA转入肝癌细胞系HCC 92 0 4中 ,通过外加Zn离子诱导目的基因的表达 .免疫印迹分析及RT PCR检测 p2 7kip1基因在蛋白质和mRNA水平上的表达 ;细胞活力实验检测转染 p2 7kip1基因对细胞增殖的作用 ;并将转染的肝癌细胞接种于裸鼠皮下 ,观察该肿瘤细胞的致瘤情况 .结果 :转染 p2 7kip1的HCC 92 0 4细胞在mRNA和蛋白质水平均显 p2 7kip1高表达 .细胞活力检测显示在外加Zn离子 4 8h后 ,细胞生长被抑制 35 % ;转染 p2 7kip1的HCC 92 0 4细胞在裸鼠体内的致瘤能力明显下降 [(0 .6 2± 0 .12 )vs (1.31± 0 .17) ,P <0 .0 1) ].结论 :外源性p2