AFP基因转染CD34^+造血干细胞来源的树突状细胞诱导特异性抗肝癌免疫

摘要

目的: 以AFP基因转染CD34+造血干细胞来源的树突状细胞(DC),诱导DC产生特异性抗肝癌免疫,观察其对肝癌细胞的杀伤.方法: 采用化疗和集落刺激因子动员肝癌患者外周血造血干细胞,血细胞分离机采集CD34+造血干细胞,IL 4、GM CSF联合TNF α刺激CD34+细胞分化为DC.通过脂质体转染的方法将携带人AFP基因质粒pEGFP AFP转染树突状细胞,MTT法检测对人肝癌细胞HepG2的特异性杀伤.结果: 经细胞因子刺激诱导培养的DC具有典型的分枝状突起,高表达CD11C,CD80,CD86.转染AFP基因后可见到转染细胞表达绿色荧光蛋白,细胞化学染色胞质内可见到红色颗粒.MTT法检测AFP基因转染后的DC可诱发特异性CTL反应杀伤HepG2细胞,AFP基因转染组、空载体组和对照组的杀伤率分别为( 92 0±3 5 )%, ( 75 5±4 1 )%和(72 9±3 4)%,转染组与空载体组和对照组间存在显著性差异(P<0 05).结论: AFP基因转染CD34+造血干细胞来源的DC可诱导特异性CTL反应杀伤肝癌细胞.