不同合成方法对4种渔药人工抗原免疫原性的影响

摘要

目的 建立4种常用渔药磺胺甲恶唑(sulfamethoxazole,SMZ)、新霉素(neomycin,NEO)、恩诺沙星(enrofloxacin,EF)和氟苯尼考(florfenico,FF)人工抗原合成及免疫原性的检测方法,为其单克隆抗体制备及渔药残留快速检测奠定基础.方法 对4种渔药分别采用重氮化法、戊二醛法(GA)、碳二亚胺法(EDC)和混合酸酐法合成人工抗原.用紫外扫描法(UV)和聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)对人工合成抗原进行鉴定,并用ELISA法检测人工抗原的免疫原性.结果 重氮化法与GA法都能合成SMZ人工抗原,重氮化法合成抗原的紫外峰值与电泳条带位移更明显,抗体效价为1×104;EDC法与GA法均可合成NEO人工抗原,但EDC法合成抗原的电泳条带位移更加明显,且抗体效价为1×104;混合酸酐法合成EF人工抗原失败,EDC法可合成EF人工抗原且合成抗原的紫外峰值与电泳条带位移明显,抗体效价为1 ×104;GA法合成的FF人工抗原的紫外峰值与电泳条带位移明显,抗体效价高达1×105.结论 SMZ人工抗原的合成采用重氮化法较好,FF人工抗原的合成采用戊二醛法较好,NEO与EF人工抗原的合成采用碳二亚胺法较好.