基于特征肽段结合超高效液相色谱-串联质谱法的乳制品真实性鉴别方法研究

摘要

目的基于超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)建立乳制品中乳铁蛋白、乳桥蛋白、奶牛A1β-酪蛋白和A2β-酪蛋白、水牛A2β-酪蛋白的检测方法,开展市售乳制品中功能性蛋白质检测和乳制品真实性鉴评分析。方法乳蛋白经酶解后,应用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(ultra performance liquid chromatography-triple quadrupole-Orbitrap high resolution mass spectrometry,UPLC-Q/Orbitrap HRMS)和UPLC-MS/MS筛选获得可用于定性定量分析的特征肽段,基于UPLC-MS/MS建立同时检测LF、LPN、奶牛A1β-CN、奶牛A2β-CN和水牛A2β-CN的方法并应用于乳制品检测。结果5种待测蛋白在相应的浓度范围内线性关系良好(r^(2)>0.99),加标回收率在82.1%~105.5%之间,相对标准偏差均小于5%,78份乳制品的检测结果表明同类样品LF含量差异较大,不同类液体乳中LPN均值差异不大。结论本方法性能良好,适用于乳制品中乳桥蛋白等功能性蛋白的同时检测,也可以实现乳制品中乳蛋白物种来源的鉴别。