中华绒螯蟹胚胎的玻璃化冷冻保存

摘要

研究了中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）4个不同发育时期胚胎对A号玻璃化液的耐受性和玻璃化冷冻保存。结果表明,不同时期的胚胎对玻璃化液的耐受能力不同,其中卵裂期胚胎对玻璃化液的耐受能力较差（20~30 min）,前无节幼体期和原溞状幼体期胚胎在玻璃化液中的适应时间较长（40~60 min）;随着平衡时间的延长,中华绒螯蟹各个时期的胚胎成活率逐渐下降。中华绒螯蟹前无节幼体期胚胎在A号玻璃化液中平衡40 min,0.25mol/L的蔗糖分别洗脱5、10、15、20 min后,胚胎成活率无显著性差异（P＆0.05）。前无节幼体期胚胎在A号玻璃化液中平衡40 min,在–196℃冷冻40 min,快速解冻后用0.25 mol/L的蔗糖洗脱10 min,有8个胚胎成活,成活率为（9.3±2.5）%,胚胎培养至第4天死亡;原溞状幼体期胚胎在A号玻璃化液中平衡40 min,在–196℃冷冻35 min,经相同浓度的蔗糖洗脱相同的时间,有7个胚胎成活,成活率（11.3±3.6）%,培养至第6天时,1个胚胎孵化出膜,出膜胚胎成活1d后死亡。