大菱鲆内脏结节病病原的分离与鉴定

摘要

2017年8月, 天津市滨海新区某养殖场大菱鲆(Scophthalmus maximus)发生病害, 累计死亡率约为25%, 患病鱼体表无明显症状.通过肉眼和病理组织切片观察发现, 患病鱼肾脏、脾脏、肝脏和肠道存在大量圆形结节, 肾脏、肝脏和脾脏组织病变明显, 肾小管坏死, 肝细胞脂肪变性, 脾脏中存在大量的坏死细胞.此外, 在脾脏和肾脏组织中发现大量的抗酸杆菌.利用传统病原菌分离方法, 从具有典型症状的濒死大菱鲆肾脏组织分离到优势菌株myco-10, 利用该菌株注射攻毒能导致健康大菱鲆 66.7%的死亡率, 且表现出与自然发病鱼相同的症状.采用 16S rDNA、 Hsp65 、 ropB基因序列分析, 构建系统发育树并结合细菌形态特征、生理生化测试对菌株myco-10进行鉴定, 结果显示, 菌株myco-10的16S rDNA、 Hsp65、 ropB基因序列与分枝杆菌属细菌(Mycobacterium spp.)相似度最高, 且在系统发育树中与海分枝杆菌(Mycobacterium marinum)和溃疡分枝杆菌(Mycobacterium ulcerans)聚为一簇, 生理生化反应与海分枝杆菌一致.综合生理生化特征和基因序列分析结果, 将菌株 myco-10 鉴定为海分枝杆菌.这是中国首例分枝杆菌引起大菱鲆病害的报道, 可为大菱鲆内脏结节病的防治提供参考资料.