圆形碘孢虫完整孢子ELISA的建立

摘要

探索建立鱼类寄生圆形碘孢虫(Myxobolus rotundus Nemezek,1911,Myxosporea,Bivalvulida)完整孢子酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测的可行性,对丙酮、戊二醛、甲醛、多聚甲醛、乙醇等几种常用固定剂应用于此方法的效果进行评价,初步建立了针对鱼类黏孢子虫的完整孢子ELISA检测模式.结果显示,同比其他几种固定剂,2%的多聚甲醛、0.25%的戊二醛对圆形碘孢虫完整孢子ELISA有较好的效果,经二者固定后,最低可检出10个成熟的完整孢子,这为筛选鱼类黏孢子虫孢子表面抗原分子的特异性配体,如单克隆抗体及基因工程抗体或抗体片断,分析其表面分子性质奠定了基础.同时,讨论了该方法在鱼类黏孢子虫病原检测、属种鉴定、系统发育及黏孢子虫基础生物学研究等方面的潜在应用价值.