脊尾白虾14-3-3基因cDNA全长的克隆和表达分析

摘要

利用本实验室构建的脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)血细胞cDNA文库中脊尾白虾14-3-3巨球蛋白基因EST序列,采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术,克隆获得脊尾白虾14-3-3基因cDNA全长,命名为Ec14-3-3.该基因全长2905 bp,包含744 bp的开放阅读框,编码247个氨基酸组成的蛋白质,分子量为27.95kD,理论等电点为4.65.同源性分析表明,脊尾白虾Ec14-3-3氨基酸序列与斑节对虾(Penaeus monodon) 14-3-3的同源性最高,达到98％.荧光定量PCR分析结果表明,Ec14-3-3基因在血细胞、卵巢、肝胰腺等组织中均有表达,其中血细胞中Ec14-3-3相对表达量最高.感染鳗弧菌和WSSV后6h,脊尾白虾血细胞和肝胰腺中Ec14-3-3基因的表达量较对照组均显著增加(P＜0.05),且具有明显的时间差异性.本研究结果表明,Ec14-3-3基因在脊尾白虾免疫反应中发挥重要作用.