欧洲鳗免疫球蛋白单克隆抗体的制备与特性

摘要

应用杂交瘤单克隆抗体技术制备了13个分泌抗欧洲鳗免疫球蛋白的单克隆抗体细胞株,并对这些单克隆抗体的特性进行了分析.经抗体级份和亚级份测定,其中IgM有3株,IgG1有5株,IgGa有3株,IgGb有2株;所有的单克隆抗体与欧鳗免疫球蛋白均有ELISA反应特性,抗体滴度104～107,有七株单抗具有WESTERNBLOT反应特性,能在变性条件下识别欧鳗免疫球蛋白的重链.进一步实验证实这些单抗能特异地识别欧洲鳗、日本鳗的免疫球蛋白,而与鲫、淡水白鲳、罗非鱼、胡子鲶、美洲斑点叉尾鲴血清免疫球蛋白以及水产动物常见病原菌如气单胞菌、爱德华氏菌、弧菌、柱状屈桡杆菌、沙门氏菌及大肠杆菌等无任何交叉反应.单克隆抗体9D7,对纯化的欧洲鳗免疫球蛋白的检测灵敏度为16ng.实验结果证明这些单抗具有高度特异、高度灵敏等特点,可用于鳗鲡免疫球蛋白的结构分析、免疫应答水平监测和病原诊断,具有广阔的应用前景.