胡子鲶致病性气单胞菌的分离鉴定及其致病力与毒力基因型相关性

摘要

为探讨广西南宁市、浦北县和玉林市暴发性死亡胡子鲶的病原菌及其所携带6种毒力基因对其致病力的影响,用常规方法从病鱼的心脏、肝脏等部位分离细菌,人工感染实验确定病原菌的致病性,以API 20NE生化鉴定和16S rRNA分子鉴定相结合的方法对病原菌进行鉴定,采用PCR扩增法检测病原菌的6种毒力基因携带情况.结果显示,从患病鱼中共分离到5株病原菌,其中嗜水气单胞菌3株,温和气单胞菌2株.3株嗜水气单胞菌与标准菌株Aeromonas hydrophila ATCC 7966(CP000462)的亲缘关系最近,相似性均为99.8％,2株温和气单胞菌与标准菌株Aeromonas sobria NO.106(AB472903.1)的亲缘关系最近,相似性均达99.9％.6种毒力基因在5株病原菌中的阳性检出率分别为Act和Aer基因100％,ahal、hly和Alt基因均为80％,ahp基因仅20％;毒力基因型共3种,在5株气单胞菌中分布情况为Act+ahal+hly+Alt+ahpAer+3株,占实验菌株的60％,为主要的毒力基因,Ac+ahal+hly+Alt+ahp+Aer+和Act+ahalhly+Alt+ahp+Aer+各1株,各占20％.携带全部所检6种毒力基因的菌株致病力最强,只携带Act和Aer2种毒力基因的菌株致病力最弱.ahp基因在菌株的致病力中起重要作用,病原菌的致病力是多种毒力基因协同作用的结果.