外源性野生型p53基因对K562细胞的作用

摘要

为了研究外源性野生型p533基因(wt-p53)对K562细胞的作用,探索p53基因治疗白血病的可能性,两种p53基因pC53-SN3(wt p53cDNA)和pN53cG(Val135)(32.5℃表现wt p53功能)通过脂质体介导的DNA转染法导入无P53蛋白表达的K562细胞,获得细胞克隆K-SN3及K-pN53cG.通过生长曲线、克隆形成率、细胞周期分析、片段化DNA及TUNEL检测、联苯胺染色等指标观察外源性wt p53基因对K562细胞的影响.结果显示:①RT-PCR检测K-SN3及K-pN53cG均获表达p53基因,但前者表达明显低于后者;②K-SN3,K-pN53cG(32.5℃)细胞生长减慢,克隆形成明显受抑,且Co/G1期增加,S期减少,以上现象均以K-pN53cG细胞(32.5℃)更明显;③K-pN53cG(32.5℃)可检测到明显凋亡改变,而K-SN3则向红系分化,说明wt p53基因表达使K562细胞生长受到明显抑制,并提示p53低表达可能促使K562细胞向红系分化,而p53高表达诱导K562细胞出现凋亡.wt p53对于白血病基因治疗有潜在的应用价值.