转化生长因子-β1对脐血单个核细胞增殖周期及凋亡的影响

摘要

通过检测转化生长因子-β1(TGF-β1)对脐血单个核细胞增殖周期及凋亡的作用,探讨其对造血进行负调控的机制.采用5'-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入法检测TGF-β1对细胞DNA合成的影响;应用Western blot检测TGF-β1对G1期细胞周期蛋白cyclin A,cyclin D1,CDK2和CDK4表达的影响;用姬姆萨染色和流式细胞分析法检测TGF-β1对细胞凋亡的作用.结果表明:①培养细胞加入10%胎牛血清(FBS)和1,2及5 ng/ml的TGF-β1 12小时后,BrdU的OD值与对照(10%FBS)组相比有显著性差异(P＜0.01);继续培养24小时后,1 ng/ml TGF-β1组的BrdU检测OD值与10%FBS组相比无显著性差异(P＞0.05),而2 ng/ml和5 ng/ml TGF-β1组的OD值与10%FBS组相比差异有显著性(P＜0.05).②与对照组相比,2 ng/ml TGF-β1还可明显抑制cyclin A,cyclin D1,CDK2和CDK4的表达.③与2 ng/ml TGF-β1共培养12和24小时后,细胞出现凋亡特征性改变,凋亡率分别为14.42%和31.98%;而对照组未见明显形态变化,凋亡率分别为4.71%和5.76%.结论:TGF-β1可通过抑制造血细胞DNA的合成和G1期细胞周期蛋白的表达,从而阻止细胞进入S期,抑制细胞增殖.TGF-β1还可促进造血细胞凋亡,因而是一个重要的造血负性调控因子.