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VEGF反义核酸对 HL-60细胞作用和机制研究

     

摘要

本研究探讨血管内皮生长因子(VEGF)反义核酸对HL-60细胞生长的量效和时效关系,并研究其作用机制以揭示VEGF基因新的功能.用含20个脱氧核糖核酸的反义核酸A7(用计算机模拟设计和实验筛选出的最优序列)全硫代修饰,以脂质体介导进入细胞,培养72小时后用MTT法计算细胞生长抑制率;采用台盼蓝拒染法每24小时观察细胞存活情况并计数;用Giemsa染色观测细胞形态学改变;用流式细胞仪检测细胞凋亡百分数;用VEGF ELISA试剂盒测定蛋白的水平.结果显示,反义药物对HL-60细胞生长有明显抑制作用,呈剂量依赖关系,并且下调VFGF蛋白的表达;反义药物对HL-60细胞的凋亡无明显影响.结论:VEGF反义药物抑制HL-60细胞生长的机制是抑制细胞增殖,而不是促进细胞凋亡,内源性VEGF蛋白具有促进HL-60细胞增殖的功能.

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