利用基因芯片技术研究造血生长因子在脐静脉内皮细胞中的表达

摘要

为探讨利用基因芯片技术研究脐静脉内皮细胞中造血生长因子基因的表达情况,将体外培养的人脐静脉内皮细胞(ECV304)分为血管内皮生长因子(VEGF)处理组(添加50 ng/ml的rhVEGF165)和正常对照组;培养24小时后收获细胞,提取总RNA,制备Cy3-dUTP标记的对照组cDNA探针和Cy5-dUTP标记的VEGF组cDNA探针,并与表达谱芯片杂交.杂交信号经荧光共聚焦显微镜扫描后,计算机分析基因表达情况.结果显示,两组细胞均表达多种造血生长因子及受体如Epo/R、GM-CSF/R、G-CSF/R、LIF、IL-3、TPO、Flt-3和SCF;同时也表达多种生长因子(VEGF、IGF2、PDGFA、PDGFB、TGFβ1)和生长因子受体(神经纤维黏蛋白-1,神经纤维黏蛋白-2,TGFβ-R1);此外,共有24个基因存在差异表达.结论:利用基因芯片技术能够在短时间内迅速而准确地分析脐静脉内皮细胞众多造血生长因子及其受体的表达情况,为进一步研究内皮细胞的生物学特性提供了有效手段.