胎盘因子的制备及其对淋巴细胞免疫调节作用的体外研究

摘要

了建立制备胎盘因子(placenta factor,PF)的新方法,研究PF理化性质,并探讨PF体外应用对淋巴细胞的影响,应用超滤法制备PF,对PF的含量及各种成分的分子量进行测试,并以环孢素A(CsA)为阳性对照,生理盐水(NS)为阴性对照.应用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测植物血凝素(PHA)诱导的淋巴细胞增殖及混合淋巴细胞反应(MLR);应用流式细胞术检测T细胞CD69的表达;应用乳酸脱氢酶释放法测定自然杀伤(NK)细胞对肿瘤细胞K562的杀伤作用.结果表明:在本研究中所制备的PF是一组小分子多肽类物质,主要含有两种成分,分子量分别为9.187 kD及4.794 kD;用Bmdford法证实,多肽质量为5.7-6.9 mg/g鲜重胎盘.体外研究显示,PF抑制PHA诱导的淋巴细胞增殖及混合淋巴细胞反应的作用与环孢菌素A(CsA)相当(P＞0.05).PF和CsA均可下调佛波酯(PMA)+离子霉素(ionomycin)刺激后T淋巴细胞活化抗原CD69的表达(PF vs CsA,P＞0.05).细胞杀伤试验显示,PF组NK细胞杀伤活性略高于或等于NS组(P＞0.05),而CsA组杀伤活性明显低于NS组(P＜0.05).结论:建立了制备PF的新方法,并首次证实PF在体外对T细胞有强大的免疫抑制作用,可抑制由丝裂原及异基因抗原诱导的T细胞的增殖及活化,而且并不影响甚或促进NK细胞对肿瘤细胞的杀伤.这一结果表明,PF在抑制移植物抗宿主病(GVHD)的同时,或许可以较好地保留移植物抗肿瘤效应(GVT),是一种较理想的、有应用潜能的抗GVHD制剂.