PCR定点诱变方法构建BCR-ABL cDNA竞争性PCR内参照物

摘要

本实验通过合成与原有下游引物 (B)相似的一条新引物 (B′) ,经聚合酶链反应 (polymerasechainreaction ,PCR)扩增出比原BCR ABLcDNA序列减少了 4个碱基的参照物 ,达到定点诱变的目的。经酶切分析证明 ,两型BCR ABLmRNA均可通过此方法得到相应的cDNA参照物。参照物和待测模板的共扩增产物可通过毛细管电泳达到基线分离 ,证明了其可行性。该参照物可用于慢性粒细胞白血病BCR ABL融合基因的竞争性PCR 。