Paraburkholderia caffeinilytica CF1咖啡因降解关键酶CdnB的特性

摘要

CdnB是在Paraburkholderia caf f einilytica CF1咖啡因降解途径中催化3,7-二甲基黄嘌呤生成7-甲基黄嘌呤的N3-脱甲基酶.本实验通过基因重组在大肠杆菌中表达CdnB-His6,利用亲和层析法进行纯化.经SDS-PAGE结合Native-PAGE,测定其分子质量为58 ku.CdnB的最适底物为3,7-二甲基黄嘌呤,最适反应温度为30℃,最适反应pH为8.0,在pH 6.5～8.5酶活力保持稳定.除Fe2+对该酶活力有促进作用外,其他金属离子对该酶活力有不同程度的抑制作用,其中Co2+及Cu2+对酶活性抑制程度最为显著.