摘要:石油中的烷烃和多环芳烃等烃类物质是高毒性的环境污染物,具有潜伏期长、影响面大、生态危害严重、治理困难等特征,已成为环境污染的主要来源.利用微生物降解作用来清除石油中的烃类物质被认为是一种可靠、高效、环保的生物环境修复方法.本实验室前期从海洋环境中分离到一株具油类浮起特性、降解烃类物质的红球菌P14.本文在此研究的基础上,进一步对红球菌P14降解烷烃类物质的相关功能基因alkB进行研究,通过RT-PCR分析,红球菌P14的、alkB3基因在烷烃C16、C24、C28诱导下表达量均上调,说明这两个基因与烷烃降解有关系,且alkB1基因的表达高于alkB3,说明在烷烃的降解过程中,alkB1扮演更为重要的角色;其中alkB1序列全长1224bp,编码408个氨基酸;alkB3基因序列含有l152bp,编码384个氨基酸.对alkB1、alkB3分别进行克隆、表达,成功构建了两株重组菌株 (E.coli BL21-pET-32a(+)-alkB1、E.coli BL21-pET-32a(+)-alkB3).在30℃培养30h,测定重组菌对烷烃C16、C24、C28的降解率,初步结果显示,E coli BL21-pET-32a(+)-alkB1可能对烷烃有一定的降解能力,而E.coli BL21-pET-32a(+)-alkB3则没有.