强力霉素对糖尿病小鼠肌肉转染人胰岛素因的调控作用

摘要

[目的]研究强力霉素对糖尿病小鼠肌肉转染人胰岛素基因表达的调控作用。[方法]构建prTA-tet4-rhINS质粒;以链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导昆明小鼠成糖尿病模型。采用电穿孔法转移质粒prTA-tet4-rhINS,通过强力霉素(doxcycline,Dox)水给药/撤除以评价四环素系统调控人胰岛素表达的可行性。检测末梢血糖,血清人真胰岛素及小鼠肌肉组织人胰岛素原基因mRNA表达情况。[结果]电穿孔转染目的质粒胰岛素后,立即予饮Dox水,可在小鼠肌肉组织中检测到mRNA表达,第2周降糖效果最佳,撤除强力霉素后,血糖回升,于48 h升至转染前水平,再次予饮Dox水后,血糖逐渐下降,72 h内达到撤药前水平。重复给药/撤药两次结果一致。[结论]通过给药/撤除Dox可以实现对人胰岛素原基因表达的开关调控。