沉默miR-21对子宫内膜癌顺铂耐药细胞株Ishikawa／DDP的影响

摘要

目的：观察沉默miR-21对子宫内膜癌顺铂耐药细胞株IShikawa／DDP的影响。方法：以Lipofectamine 2000介导miR-2l抑制剂转染Ishikawa／DDP细胞株，同时设置阴性组和耐药组。采用反转录PCR检测miR-21、多药耐药基因MDRl、促凋亡基因Bax和抗凋亡基因Bcl-2的表达。采用蛋白印迹法检测多药耐药蛋白P-gP、促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。采用噻唑蓝比色法检测细胞对顺铂的敏感性。采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果：与耐药组和阴性组比较，抑制剂组miR-21，MDRl和Bcl-2mRNA表达显著下调（P〈0．01），而BaxmRAN表达显著上调（p〈o．001）；抑制剂组p-gP和Bcl-2蛋白表达显著低下调（P〈0．05），而Bax蛋白表达显著上调（P〈0．001）。与耐药组和阴性组比较，顺铂对抑制剂组的IC50值显著（P〈O．001）；顺铂对抑制剂组细胞的诱导凋亡率显著增加（P〈0．001）。结论：沉默miR-21可显著提高Ishikawa／DDP细胞株对顺铂的敏感性，并促进细胞凋亡，其具体机制可能与下调MDRl，p-gP和Bcl-2表达，以及上调Bax表达有关。