EGFP基因修饰大鼠胚胎中脑神经干细胞的建立

摘要

目的 建立增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因修饰大鼠胚胎中脑神经干细胞.方法 以质粒pEGFPN1转染培养第三代的大鼠胚胎中脑神经干细胞(mNSCs),经G418筛选后,分别进行nestin免疫细胞化学鉴定和诱导分化后β-Ⅲ-tubulin、GFAP、CNPase免疫细胞化学鉴定.结果 EGFP在基因转染12 h后开始表达,24 h后明显增加,48 h达到高峰,经G418筛选1月后有阳性克隆形成,EGFP基因修饰不影响大鼠胚胎mNSCs的增殖与分化.结论 成功建立EGFP基因修饰大鼠胚胎mNSCs,为进一步开展帕金森病的细胞移植治疗研究奠定基础.