BDNF、EGFP基因修饰大鼠胚胎腹侧中脑神经干细胞的建立

摘要

目的建立脑源性神经营养因子(BDNF)、增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因修饰大鼠胚胎腹侧中脑神经干细胞(mNSCs)。方法以FuGENE HD转染试剂介导质粒pcDNA3-BDNF、pEGFPN1共转染第三代E14大鼠胚胎mNSCs。荧光显微镜观察EGFP表达情况;免疫细胞化学方法和Western blot鉴定BDNF的表达;体外诱导分化后免疫细胞化学鉴定其分化能力。结果基因转染12 h后EGFP开始表达;免疫细胞化学、Western blot结果表明BDNF能在细胞中正确表达;体外诱导分化研究表明BDNF、EGFP基因修饰不影响大鼠胚胎mNSCs的增殖与分化。结论成功建立了BDNF、EGFP基因修饰大鼠胚胎mNSCs,可为进一步开展帕金森病的细胞移植治疗研究奠定基础。