白蛋白超载通过线粒体经典途径诱导肾小管上皮细胞凋亡

摘要

目的 研究线粒体经典途径在白蛋白诱导的肾小管上皮细胞凋亡中的作用.方法 大鼠肾近曲小管细胞分别用0～40 mg/ml低内毒素胎牛血清白蛋白处理24 h,或用20 mg/ml白蛋白处理0～24 h,或在白蛋白处理同时加入蛋白水解酶抑制剂.处理后的细胞分别进行以下处理:固定后用Hoechst 33342染色供计数凋亡细胞比例;以碘化丙啶染色观察坏死细胞;冰上裂解后供caspase-3活性测定;分离胞浆和线粒体组分供免疫印迹法分析Bax和细胞色素C的变化;固定后供免疫荧光染色.结果 白蛋白呈剂量和时间依赖性诱导肾小管上皮细胞凋亡,并伴随有线粒体Bax活化、细胞色素C释放和蛋白水解酶激活,蛋白水解酶抑制剂可以抑制细胞凋亡.结论 线粒体经典凋亡途径参与白蛋白诱导的肾小管上皮细胞凋亡.