翠云草总黄酮经环状RNA circ_0006528通路抑制结直肠癌恶性生物学行为研究

摘要

目的 探讨翠云草总黄酮对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响及可能机制。方法 体外培养结直肠癌细胞Caco-2,用不同剂量(10、20、40μg/mL)翠云草总黄酮干预24 h、或转染环状RNA circ_0006528小干扰RNA至Caco-2细胞后培养24 h、或用40μg/mL的翠云草总黄酮干预转染circ_0006528过表达载体的Caco-2细胞24 h,然后用检测细胞存活与生长比色法(MTT)、克隆形成实验、划痕实验和流式细胞术分别检测细胞活性、克隆形成数、迁移和凋亡。Western Blot检测Bax和Bcl-2蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测circ_0006528和miR-330-3p表达。双荧光素酶报告基因实验验证circ_0006528和miR-330-3p调控关系。结果 Caco-2细胞经翠云草总黄酮干预后,细胞活性、克隆形成数、迁移距离和细胞中Bcl-2蛋白、circ_0006528的表达均降低,而凋亡率和Bax蛋白、miR-330-3p的表达升高,差异有统计学意义(P<0.05),且呈剂量依赖性。干扰circ_0006528后,Caco-2细胞活性、克隆形成数、迁移距离和Bcl-2蛋白表达降低,细胞凋亡率和Bax蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。circ_0006528靶向负调控miR-330-3p。过表达circ_0006528逆转了翠云草总黄酮对Caco-2细胞增殖、迁移和凋亡及miR-330-3p表达的影响。结论 翠云草总黄酮可能通过调控circ_0006528/miR-330-3p轴,抑制结直肠癌细胞增殖和迁移,并促进细胞凋亡。