儿童病毒性脑膜炎、脑炎中肠道病毒感染的分子生物学分型检测及临床研究

摘要

目的 探讨儿童病毒性脑膜炎、脑炎中肠道病毒感染的分子生物学分型.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及简并引物扩增并测序,利用Genbank核对分型,检测东营地区2008年1月-2012年2月63例临床诊断为病毒性脑膜炎、脑炎患儿脑脊液中的肠道病毒(EV) RNA,并结合临床特点进行分析.结果 63例病毒性脑膜炎、脑炎患儿的脑脊液经RT-PCR检测,EV感染阳性率为74.6％(47/63).利用通用引物筛选出的阳性标本,并采用简并引物经两次PCR共获得阳性结果31例(66.0％).随机抽取23条阳性片段进行克隆测序,测序结果与GenBank标准EV毒株进行同源性对比分析,相关序列同源性均在97％以上.肠道病毒引起中枢神经系统感染的临床特征在各个年龄组有所不同,33例急性期EV患儿脑脊液中白细胞数不同程度增高(均数76×106/L).结论 EV是儿童无菌性脑膜炎、脑炎的最主要的病原体.采用RT-PCR可以快速准确的检测出中枢神经系统感染的肠道病毒;采用分型引物扩增并测序,将EV的VP1部分序列与GENBANK中的EV标准毒株进行对比,根据基因序列的同源性进行EV型别鉴定是一种切实可行的方案.EV引起的病毒性脑膜炎临床症状一般较轻、无特异性,多数患儿CSF中白细胞高于正常范围.