富血小板血浆对人乳牙牙髓干细胞的增殖与向成骨分化的调控作用

摘要

目的 探讨富血小板血浆(mPRP)对人乳牙牙髓干细胞(SHED)的增殖与向成骨分化的调控中的作用.方法 收集陕西省宝鸡市中医医院门诊6～8岁儿童拔除的乳牙,酶消化法培养SHED,将细胞随机分为:对照组、3μmol/L组和10μmol/L组,依照分组依次以0μmol/L、3μmol/L、10μmol/L mPRP作用于SHED.采用MTT法检测mPRP对SHED增殖能力的影响,采用碱性磷酸酶(ALP)试剂盘检测mPRP作用于SHED后ALP活性的改变,RT-PCR方法检测细胞内骨涎蛋白与骨钙素mRNA含量的改变.结果 ①采用mPRP培养的SHED生长形态良好,单细胞形式的成纤维细胞样形态,体积较小,大多数细胞为长梭型或多角型,有些细胞呈现出立方形,细胞胞质均匀,胞体丰满.每5～7天汇合可传代.②mPRP对SHED细胞具有促进其增殖的能力,3μmol/L组与10μmol/L组SHED细胞测得的OD值均高于对照组(P<0.05).随着mPRP浓度的升高,测得的OD值增大(P<0.05).③ALP活性方面,在3μmol/L组和10μmol/L组,测得的OD值均随着时间的变化,OD值增大,且差异具有统计学意义(P<0.05).3μmol/L组与10μmol/L组测得的OD值在不同时间点上均高于对照组,且差异具有统计学意义(P<0.05).④3μmol/L组及10μmol/L组SHED细胞中骨涎蛋白和骨钙素的mRNA含量均高于对照组,且随着mPRP的浓度升高,促进作用逐渐增强(P<0.05).结论 mPRP对SHED细胞的增殖和向成骨分化均具有一定的促进作用,随着浓度的增大和作用时间的延长,其促进增殖的能力也随之增强,可见mPRP促进SHED的增殖和向成骨分化具有一定效果.