代谢工程改造大肠杆菌生产衣康酸

摘要

为了构建生长快、培养简便的高产衣康酸工程菌,在表达编码顺乌头酸脱羧酶的cad基因基础上,过表达编码柠檬酸合酶的glt基因,所得重组菌株摇瓶发酵24 h产生104 mg/L的衣康酸。通过进一步表达ACS基因构建乙酸回补途径,衣康酸含量达到128 mg/L,提高17%。外源添加柠檬酸钠和顺乌头酸对衣康酸的合成有明显的促进作用。共表达cad、glt和ACS的工程菌在IPTG诱导后0 h加入12 g/L柠檬酸钠,18℃摇瓶培养24 h,衣康酸的产量达到317 mg/L,柠檬酸盐的利用率达到66%,发酵液中仅有少量的乙酸（0.579 g/L）积累。研究结果表明:通过衣康酸合成代谢途径的强化和衣康酸前体的适当供给可以有效提高大肠杆菌生产衣康酸的能力。