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3-硝基酪氨酸人工抗原的合成与鉴定

     

摘要

通过戊二醛法将3-硝基酪氨酸与卵白蛋白(OVA)偶联,制备人工抗原,并用作免疫抗原。用紫外扫描法和聚丙烯酰胺电泳法对其进行鉴定,用BCA法测定二者结合物的质量体积分数,并测得结合物的偶联率。3NT与OVA结合物的质量体积分数为1.69mg/mL。SDS-PAGE电泳测定其分子量大于43KD。紫外分光光度法测定二者结合物与游离的3NT与游离的OVA之间存在漂移,说明3NT偶联到结合物上,估算其偶联率为5.4。用结合物免疫BALB/C小鼠,间接ELISA测定多抗上清(pAb)效价,获得了高效价的pAb。

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