脂多糖经MyD88/NF-κB信号途径抑制Bewo细胞中乙型肝炎病毒复制

摘要

目的探讨Toll样受体4（TLR4）配体脂多糖（LPS）抑制人滋养层细胞Bewo中乙型肝炎病毒（HBV）复制的作用机制,为防治HBV宫内感染提供依据。方法首先将2μg 1.3倍HBV全基因重组质粒pcDNA3.1（+）-HBV1.3转染Bewo细胞12h后,以TLR4配体LPS处理3 d。尔后用LPS处理Bewo细胞,观察IFN-β、TNF-α表达的动力学、NF-κB拮抗剂二硫代氨基甲酸吡咯烷（PDTC）对LPS诱导Bewo细胞产生细胞因子的作用。采用微粒子酶免疫分析法（MEIA）和荧光定量PCR法分别检测HBsAg、HBeAg和HBV DNA水平,并以ELISA和RT-PCR分别检测IFN-β、TNF-α水平及TIR结构域的转接蛋白（TRIF）、髓样分化蛋白（MyD88）表达。结果与对照组比较,LPS可显著抑制Bewo细胞中HBV复制（P＜0.01）,且LPS可显著诱导Bewo细胞产生TNF-α（P＜0.05）,呈时间和剂量依赖性。PDTC可抑制LPS诱导细胞产生TNF-α,显著低于对照组（P＜0.01）,但对IFN-β无显著作用（P＞0.05）。与对照组比较,LPS可诱导HBV重组质粒转染的Bewo细胞表达MyD88（P＜0.01）。结论通过MyD88/NF-κB信号途径诱导Bewo细胞产生TNF-α,TLR4配体LPS可显著抑制HBV复制。