川黄柏高效遗传转化系统建立和植株再生研究

摘要

目的:建立发根农杆菌高频转化川黄柏的有效方法.方法:利用发根农杆菌R1601转化川黄柏带子叶下胚轴,并将获得的毛状根,置于含不同生长调节物质配比的培养基上诱导产生再生植株.结果:建立的高频转化系统为选择生长10 d的川黄柏带子叶下胚轴,经过36 h的预培养,农杆菌菌液(OD600=0.6)浸染15 min、共培养4d,浸染菌液最佳配制方法是在菌液培养阶段添加60 μmol/L的乙酰丁香酮.经PCR检测证明发根农杆菌Ri质粒的T-DNA片段已整合进入川黄柏毛状根和再生植株的基因组.结论:通过改善转化条件,发根农杆菌R1601可以高效诱导川黄柏长出毛状根,并具有进一步再生完整植株的能力.