BrdU法观察常通口服液对粘连腹膜成纤维细胞增殖的影响

摘要

目的：探讨常通口服液（CTOL）对体外培养的粘连腹膜成纤维细胞（AF）增殖的影响。方法：（1）药物血清的制备：雄性SD大鼠10只，随机分为2组：正常血清组、CTOL组。大鼠灌服相应药物7d后，腹主动脉采血，分离含药血清。（2）成纤维细胞的体外培养：采用组织块贴壁培养法进行成纤维细胞培养，本实验所用细胞为第3—8代。（3）成纤维细胞的增殖：取生长状态良好的AF，按5×10^5／孔接种于24孔培养板中，分别加入：5％含药血清；5％正常血清；纤溶酶原活化剂（PAI-1），浓度为1ng／mL；纤溶酶原活化物抑制因子（tPA），浓度为1ng／mL。同时设置10％胎牛血清作空白对照孔。培养24h后，加入BrdU，37℃、5％CO2孵箱中继续孵育4h，细胞用4％多聚甲醛固定，BrdU免疫荧光检测细胞增殖情况。结果：与胎牛血清组比较，CTOL、PAI-1、tPA组的阳性率均有统计学意义（P〈0．001）；而正常血清组无统计学意义。结论：CTOL与tPA可以抑制体外培养的AF增殖，而PAI-1则促进AF增殖。