基于QPCR快速检测米饭中产呕吐毒素蜡样芽孢杆菌的研究

摘要

为了建立基于QPCR的快速方法检测米饭中产呕吐毒素蜡样芽孢杆菌,首先采用煮沸法提取蜡样芽孢杆菌基因组DNA,并利用普通PCR方法验证引物特异性,然后通过在米饭样品中添加目标菌,模拟受污染的实际样本,用QPCR技术定量检测米饭中产呕吐毒素蜡样芽孢杆菌.结果表明该方法具有快速、特异性强、灵敏度高和稳定性好的优点,能对产呕吐毒素蜡样芽孢杆菌定量.不经过增菌培养,实际样品的检测限为9.8×101 CFU/g;经过2h的增菌培养,检测限能达到100 CFU/g;并且米饭中添加其他杂菌后,不影响对蜡样芽孢杆菌的检测.建立的QPCR方法适用于米饭等相关淀粉类食品中产呕吐毒素蜡样芽孢杆菌的检测,从而为监测该菌所致食品污染以及早期相关食物中毒提供快速定量检测方法.