木薯醇腈酶cDNA的克隆及其表达载体的构建

摘要

目的 克隆木薯醇腈酶(HNL) cDNA构建表达载体,以实现木薯醇腈酶基因的高效表达.方法 运用 RT-PCR从木薯幼叶组织中扩增出HNL全长cDNA序列,将其克隆至质粒pBluescript SK中进行序列分析,再利用PCR将其再克隆到酵母表达质粒pPIC3.5K上.结果 经测序分析表明,克隆的cDNA片段和文献报道的4个木薯HNL cDNA 相比,核苷酸同源性最高为99.1%,氨基酸同源性最高为98.8%.结论 经双酶切鉴定的结果表明重组表达载体的表达载体构建成功.