玉米叶片原生质体的制备及瞬时转化体系的建立

摘要

以玉米(Zea mays L.)自交系-郑58叶肉细胞原生质体的制备条件的研究,探讨了酶解法制备玉米叶肉细胞原生质体的分离条件和影响因素.结果表明:当沿着叶脉横切叶片时,最佳酶浓度组合为纤维素酶1.0％,离析酶0.5％;最佳酶解时间为5h;最佳渗透压甘露醇浓度为0.4 mol/L;离心力为100×g、离心1 min时原生质体的产量最高.采用30％PEG-4000将去内毒素的pCAMBIA1302-mGFP的2种质粒制备的原生质体,在细胞核部位能清晰地看到绿色荧光.