高效液相色谱-荧光法测定血清苯丙氨酸和酪氨酸

摘要

目的:建立高效液相色谱-荧光法测定血清苯丙氨酸(Phe)和酪氨酸(Tyr)含量.方法:血清标本经高氯酸溶液去蛋白质后,不需要荧光衍生,取上清液20μl直接进样,用Hypersil C8色谱柱(6.0mm×300mm,10μm)分离,流动相为乙腈-水(体积比10:90),流速1.0ml/min,在激发光波长210nm,发射光波长303nm的条件下定量测定Phe和Tyr.结果:Phe线性范围为12.2～1220.0μmol/L,最低检测限为3μmol/L,批内变异系数(CV)为4.07%,批间CV为7.17%,平均回收率102.5%;Tyr线性范围为5.5～550.0μmol/L,最低检测限为0.8μmol/L,批内CV为2.99%,批间CV为5.23%,平均回收率102.2%.色氨酸、5-羟色胺、5-羟吲哚乙酸等物质不干扰实验.整个分析过程可在30min内完成;测定结果与HPLC-紫外法比较,两者有很好的相关性.结论:HPLC-荧光法能同时测定血清Phe和Tyr浓度,且简便、快速、特异性好.