完全弗氏佐剂抑制NOD鼠胰岛β细胞凋亡及其机制

摘要

目的:探讨完全弗氏佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)对非肥胖糖尿病(nonobese diabetic,NOD)鼠胰岛β细胞凋亡及凋亡相关基因Fas,FasL和Bcl-x表达的影响.方法:将4周龄NOD雌鼠随机分为CFA组(n=5)和生理盐水(NS)对照组(n=5),给CFA组鼠后脚板注射50 μLCFA,对照者鼠后脚板注射等量NS.监测血糖,若血糖连续2 d≥11.1 mmol/L即诊断为糖尿病.当NOD鼠发生糖尿病或至30周龄时,处死动物,取胰腺组织制成薄切片,HE染色观察胰岛炎,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记(TUNEL)及ABC免疫组织化学双标记染色观察并计数凋亡的胰岛β细胞,ABC免疫组织化学法染色观察并记数Fas,FasL和Bcl-x表达阳性细胞.结果:至NOD鼠30周龄时,CFA处理组鼠无1只发生糖尿病,对照组鼠有3只发生糖尿病;CFA处理组的胰岛炎积分低于NS对照组(1.820±0.962 vs.3.020±1.040,P＜0.05);CFA处理组胰岛β细胞凋亡率、Fas阳性细胞率、FasL阳性细胞率均低于NS对照组[(10.2±2.8)%vs.(15.9±6.5)%,(54.9±14.5)%vs.(75.7±12.9)%,(20.3±10.4)%vs.(27.9±12.0)%,P＜0.05],Bcl-x阳性细胞率高于NS对照组[(74.9±10.7)%vs.(66.0±18.3)%,P＜0.05].结论:CFA能够减轻NOD鼠胰岛β细胞凋亡,其机制与减少促凋亡基因Fas和FasL表达及增加抑制凋亡基因Bcl-x表达有关.