高糖对人腹膜间皮细胞的增殖和损伤及分泌细胞因子的影响

摘要

目的:探讨高糖介导腹膜纤维化的可能机制.方法:原代培养的第3代人腹膜间皮细胞(HPMCs)分为不同时间(24,48 h)的对照组(F12)和高糖组(F12+4%葡萄糖).用MTT法测定细胞增殖,乳酸脱氢酶(LDH)法观察细胞损伤程度,采用酶联免疫法(ELISA)测定纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)蛋白水平以及采用RT-PCR测定FN,TGF-β1和纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)mRNA表达.结果:①高糖明显抑制细胞增殖,24 h和48 h高糖组与同一时间点对照组比较,MTT吸光度值均明显下降(P＜0.001或P＜0.01);②高糖明显导致细胞损伤,24 h和48 h高糖组与同一时间点对照组比较,培养液中LDH含量均明显增加(均P＜0.001);③高糖培养24,48 h均使FN,CTGF和TGF-β1蛋白表达增加(P＜0.05或P＜0.001);④高糖使FN,TGF-β1和PAI-1 mRNA表达均上调.结论:高糖能够抑制HPMCs增殖,损伤HPMCs,并刺激HPMCs分泌更多的TGF-β1,CTGF,FN和PAI-1,从而使HPMCs细胞外基质生成增多、降解减少,最终导致腹膜纤维化的形成.