阿尔兹海默病相关基因nicastrin启动子的克隆和鉴定

摘要

目的:克隆和鉴定与阿尔兹海默病发生有关的γ-分泌酶的组成蛋白之一nicastrin(NCT)基因的启动子,用于开展其转录调控机制的研究.方法:用PCR方法从人基因组DNA中分离NCT基因编码区上游大小约为1.8 kb的片段并以此为基础对启动子进行两端删除分析,分别扩增大小不等的片段,与Pgl3-Enhancer荧光素酶报告基因载体质量组,通过瞬时转染Hela细胞,细胞裂解液进行双荧光素酶活性分析,分离NCT基因的启动子区.结果:NCT基因启动子的420 bp片段在Hela细胞中具有最强的启动活性,另237 bp片段为有活性的最小片段.结论:NCT启动子很可能位于翻译起始位点上游- 432/-133处,其基础启动子位于-359/-90.