冬虫夏草提取液对NRK-52E缺血再灌注损伤时凋亡及TLR-4表达的干预作用

摘要

目的:观察体外缺血再灌注损伤(IRI)时大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)凋亡情况和Toll样受体4(TLR-4)基因表达,以及冬虫夏草提取液对其干预作用.方法:将体外培养的NRK-52E分成对照组、模型组和冬虫夏草干预组,均以去除培养基后经10~(-10) mol/L抗霉素A刺激1 h后恢复培养基的方法,模拟IRI过程.在多个时间点,以流式细胞仪检测凋亡率, RT-PCR法检测凋亡相关基因(Bax,Bcl-2)和TLR-4基因的表达变化.结果:与对照组相比,模型组细胞凋亡率明显增高(P＜0.01),Bax mRNA表达上调(P＜0.05),Bcl-2 mRNA表达下调(P＜0.05)以及TLR-4 mRNA表达上调(P＜0.05).冬虫夏草干预可明显影响缺血再灌注损伤时Bax,Bcl-2的表达,降低凋亡水平,并能减轻TLR-4高表达程度(均P＜0.05).结论:NRK-52E 在IRI时有明显的细胞凋亡,以及TLR-4基因表达异常.冬虫夏草提取液可能通过抗凋亡和影响TLR-4表达减轻肾IRI.