亚麻木酚素对母鼠反式脂肪酸暴露致子代肾氧化损伤的保护作用

摘要

目的:反式脂肪酸(trans-fatty acid,TFA)主要来源于食品工业生产过程,TFA危害健康是全球关注的公共卫生问题。亚麻木酚素(secoisolariciresinol diglucoside,SDG)是植物多酚类化合物,具有抗氧化性能。本研究旨在探讨SDG对妊娠期及哺乳期母代TFA暴露致子代小鼠肾氧化损伤的保护作用。方法:30只c57BL/6雌鼠随机分为5组,分别为对照组、TFA暴露组及SDG低(TFA+LSDG)、中(TFA+MSDG)、高(TFA+HSDG)剂量干预组,每组6只。除对照组外,其余4组母鼠实验期间每日经口灌胃TFA 1次,剂量为60 mg/(kg·BW);对照组母鼠用生理盐水每日灌胃1次;同时3组SDG干预组分别用含10、20、30 mg/kg SDG饲料自由喂养;隔夜受孕,第2天早晨出现阴栓判定为受孕并将其纳入实验阶段,至哺乳期第21天实验结束。记录子鼠体重、肾质量,计算肾脏系数;采用HE染色观察子鼠肾病理学变化;二氢乙啶(dihydroethidium,DHE)荧光探测针染色检测活性氧(reactive oxidative species,ROS)水平;子鼠肾组织匀浆后检测总超氧化物歧化酶(total Superoxide Dismutase,T-SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色分析核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)和血红素加氧酶-1(hemeoxygenase-1,HO-1)蛋白的表达;real-time PCR检测Nrf2和HO-1 mRNA表达;蛋白质印迹法检测抗氧化酶系铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-superoxide dismutase,Cu/Zn-SOD)、锰超氧化物歧化酶(Mn-superoxide dismutase,Mn-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶1(glutathione peroxidase-1,Gpx-1)蛋白的表达和通路相关蛋白Nrf2、HO-1的表达。结果:与对照组相比,TFA暴露组子鼠肾脏系数上升;肾组织形态结构异常;T-SOD酶活性下降,MDA含量上升;ROS水平升高;抗氧化酶系Cu/Zn-SOD、Mn-SOD、GPx-1蛋白的表达水平下降;Nrf2、HO-1 mRNA表达下降,且Nrf2和HO-1蛋白的表达水平下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与TFA暴露组相比,SDG低、中、高剂量组均出现ROS水平降低,T-SOD酶活性、Cu/Zn-SOD、GPx-1、Mn-SOD、Nrf2和HO-1蛋白的表达水平上调;中、高剂量组可致子鼠肾脏系数及MDA含量下降;高剂量组可上调Nrf2 mRNA表达,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:妊娠期及哺乳期母鼠TFA暴露会导致子代肾氧化损伤,而SDG干预可能通过Nrf2/HO-1通路来减轻TFA诱导的氧化损伤。