高效液相色谱法测定肺组织中三磷酸腺苷含量

摘要

目的:建立用高效液相色谱技术测定肺组织中三磷酸腺苷(ATP)含量的分析方法,为临床肺保护和肺保存研究提供可靠的检测手段.方法:肺组织经高氯酸溶液沉淀蛋白后制成匀浆液,上清液用氢氧化钾溶液调pH值为中性后,用反相离子对高效液相色谱法(RP-HPLC)测定ATP含量.色谱条件:色谱柱用 Agilent XDB-C18柱,流动相为甲醇-KH2PO4缓冲液(内含4 mmol/L IPR-A离子对试剂),在259 nm紫外波长处检测.采用外标定量法计算ATP含量.结果:此种方法使ATP在8.518 μmol/L～170.3 μmol/L浓度范围内有良好的线性关系(r=0.9994),方法的回收率为97.8%～104%,日内精密度RSD＜5%.结论:其方法快速、灵敏,具有较高的准确度和精密度,适用于人和动物肺组织中ATP含量的测定.