维生素C促进小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞的实验研究

摘要

目的:利用经典的悬滴培养法形成拟胚体(EBs),诱导小鼠胚胎干细胞(mESCs)在体外分化为心肌细胞,观察维生素C作为诱导剂对mESCs体外诱导分化为心肌细胞的影响,进而寻找一种高效、安全的诱导方法.方法:复苏mESCs,传代培养后,利用悬滴法使mESCs形成拟胚体,用含0.1mg/mL维生素C的分化培养基对其进行诱导分化,以不添加任何诱导剂作为对照组,观察出现搏动拟胚体的时间,搏动拟胚体的数量,计算分化比率,统计搏动频率,并进行免疫荧光染色测定心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达.结果:小鼠胚胎干细胞可自发分化为心肌细胞,但效率较低,0.1mg/mL的维生素C能明显提高mESCs分化为心肌细胞的效率,约83.3％的EBs出现搏动,显著高于未添加任何诱导剂组,搏动频率为(81.2±7.8)次/分钟.两组搏动心肌细胞cTnT免疫染色阳性.结论:维生素C能够显著提高mESCs向心肌细胞分化效率,应用维生素C体外诱导mESCs向心肌细胞分化是一种较为理想的体外诱导方式.