人碱性成纤维细胞生长因子在昆虫细胞sf9中的表达

摘要

将人碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)基因 cDNA克隆到pFastBacI转移载体中,重组质粒转化到感受态细胞DH10Bac中,使目的基因转座入Bacmid DNA中,纯化DNA后,利用病毒噬斑实验筛选重组的杆状病毒.重组杆状病毒感染Sf9细胞,在Sf9细胞中进行表达.Western印迹结果表明:表达产物为相对分子质量约17 000的蛋白,与预计的重组蛋白相对分子质量相同,并具有较好的免疫学活性.MTT检测证实表达产物能明显促进人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的分裂增生,具有hbFGF的生物学活性.