增生期和分化期大鼠神经干细胞过氧化氢预处理氧化耐受的体外实验研究

摘要

目的 探讨神经干细胞(NSCs)在增生期和分化期过氧化氢(H2O2)预处理后H2O2损伤氧化耐受的变化.方法 分别用浓度为0.05 mmol/L、0.10 mmol/L、0.25 mmol/L、0.50 mmol/L、1.0 mmol/L的H2O2处理增生期NSC(PNSC)和分化期NSC(DNSC).用 0.50 mmol/L的H2O2处理10 min后,间隔6 h和12 h后再次给予0.50 mmol/L H2O2,观察细胞和损伤的情况.检测热休克蛋白27(Hsp27)、热休克蛋白70(Hsp70)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的变化.透射电镜(TEM)检测NSC超微结构变化.结果 经0.50 mmol/L H2O2预处理10 min,间隔12 h后DNSC可以产生H2O2耐受,并至少持续12 h;而PNSC并不能产生H2O2耐受.预处理后的DNSC在Hsp27和Hsp70阳性细胞比例显著上升(P＜0.05),TEM示存活的细胞均为比较原始的细胞.结论 在给予0.5 mmol/L H2O2预处理10 min后,间隔12 h后DNSC后产生对H2O2耐受;而PNSC不能产生耐受.这可能与Hsp27和Hsp70的增加有关.此外,这与原始状态NSC H2O2氧化耐受要高于分化状态的细胞有关.