应用HIOEC细胞单层模型研究胰岛素在口腔上皮的渗透特性

摘要

目的 用口腔永生化上皮(human immortalized oral epithelial cell,HIOEC)细胞建立Transwell单细胞层转运模型,研究不同条件和不同渗透促进剂、不同转运添加剂对胰岛素在口腔上皮细胞渗透转运中作用的影响.方法 以胰岛素为模型药,测定不同条件下(时间、温度、转运方向)、不同渗透促进剂(壳聚糖、蛋黄卵磷脂、Brij35等)、不同转运添加剂(秋水仙碱、多聚-L-氨酸)作用下胰岛素在HIOEC单细胞层的表观渗透系数Papp,观察胰岛素的渗透转运特性.结果 1)胰岛素在HIOEC单细胞层的转运不具有浓度、温度、转运方向依赖性.2)渗透促进剂Brij35、蛋黄卵磷脂和壳聚糖均能显著增加胰岛素在HIOEC单细胞层的渗透转运,其通过细胞间紧密连接破坏膜脂质的有序性,改变插入到细胞间蛋白的构象和位置,从而增加单细胞层脂质流动性与细胞间紧密连接的空间,促进胰岛素的渗透转运.3)阳离子氨基酸多聚-L-赖氨酸通过与膜表面的阴离子结合破坏细胞膜脂质性质,打开细胞间紧密连接,增加胰岛素在HIOEC单细胞层的渗透转运.结论 渗透促进剂可通过增加膜脂流动性、改变膜蛋白构象和位置、打开HIOEC细胞间紧密连接等方式提高胰岛素在HIOEC单细胞层的渗透转运.